Le service de Culture Cellulaire  met à la disposition de toutes les personnes de l’UMR8612, les lignées cellulaires et les moyens expérimentaux leur permettant d’évaluer les effets biologiques des nanovecteurs développés au sein du laboratoire (liposomes, nanoparticules…)

L’Institut Galien Paris Saclay – UMR CNRS 8612 – a pour objectif de concevoir et de développer des systèmes pharmaceutiques permettant la délivrance contrôlée et l’administration ciblée de différents principes actifs.
En effet, ceux-ci, une fois administrés par exemple par voie orale ou intraveineuse, se heurtent à des barrières biologiques (la molécule n’arrive pas à atteindre son lieu d’action) ou enzymatiques (le principe actif est dégradé rapidement). Il en résulte une diminution de son efficacité d’autant que le principe actif est distribué de façon aléatoire dans l’organisme entrainant souvent des effets toxiques. Les principes actifs véhiculés dans un vecteur de taille nanométrique sont protégés et peuvent être adressés directement à leur cible thérapeutique : on parle alors de Nanomédicaments.
De telles innovations thérapeutiques sont permises grâce à la rencontre de disciplines : pharmaciens galénistes, chimistes et physico-chimistes œuvrent ensemble à la formulation et à la caractérisation des nanomédicaments. In fine, la biologie est une composante essentielle à la caractérisation des nanomédicaments en termes de cytotoxicité, d’internalisation cellulaire ou encore de potentiel
inflammatoire.

Le service de Culture Cellulaire dispose de six postes de manipulation répondant aux exigences de type2 et sont conformes aux bonnes pratiques de laboratoire.

C’est un plateau technique qui apporte aux chercheurs et jeunes chercheurs l’expertise et met à disposition le matériel et les moyens expérimentaux permettant la caractérisation biologique des nanomédicaments.
Il mutualise les connaissances fondamentales et techniques et les méthodologies pour conduire des projets sous forme de participations classiques ou collaboratives, internes ou externes ou des prestations de service.
Le service propose des modèles cellulaires classiques et les tests effectués permettent principalement d’évaluer la cytotoxicité des formulations. Mais selon les besoins, d’autres systèmes cellulaires et approches expérimentales peuvent être configurés
sur mesure.

Une attention particulière est ortée sur :
– La qualité, la fiabilité, la traçabilité des expériences :
– Gestion rigoureuse des banques de cellules
– Banques de données sur chaque type cellulaire
– Test de détection des mycoplasmes : MycoAlert PLUS Mycoplamsa Detection Kit – LONZA
– La reproductibilité des résultats
– Bonnes pratiques de Pipetage : pipetage inverse
– Rédaction détaillée de protocoles standardisés ou adaptés selon les conditions expérimentales spécifiques
– Le respect des consignes d’Hygiène et Sécurité :
– Procédures strictes d’élimination des déchets biologiques
– Port des EPI

– Lignées cellulaires humaines ou murines, tumorales, saines
– Lignées fluorescentes, luminescentes
– Cultures primaires, commercialisées ou réalisées à partie d’exérèses
– Modèles de co-culture mimant la barrière intestinale
– Modèles mimant la barrière hémato-encéphalique
– Cultures en trois dimensions ou sphéroïdes qui peuvent être mono ou multicellulaires

ELISA :
– Mouse TNFα Uncoated Elisa Kit – Invitrogen 88-7324-88
– Mouse IL-2 Uncoated Elisa Kit – Invitrogen 88-7024-88
– Mouse IL-6 Uncoated Elisa Kit – Invitrogen 88-7064-88

Analyses transcriptomiques – Passerelle avec la Plateforme ACTAGen (TRANSPROT) :
– Extraction des ARNs
– Dosages et Contrôle Qualité des ARN
– RT-qPCR

Analyses protéomiques :
– Extraction et dosages des protéines
– Western Blot

Analyses microscopiques – Passerelle avec la Plateforme MIPSIT
– Marquage des cellules
– Distribution cellulaire des nanoparticules

Analyses in vivo – Passerelle avec la Plateforme Animex
– Amplification des cellules
– Injections aux animaux

– 5 Postes de Sécurité Microbiologique de classe II, EN 12469 NF : Thermo MSC Advantage
– 1 PSM de classe II, VBH 48 MP, EN 12469 NF, réservé à la manipulation des acides nucléiques
– 2 incubateurs Panasonic MCO-18AC-PE
– 1 incubateur Panasonic MCO-5M-PE
– 1 incubateur Thermo 8000 WJ (Hypoxie)
– 1 incubateur Narco 6101 C
– 1 incubateur LEEC Touch 190S
– 2 microscopes inversés Olympus CKK53
– 2 microscopes inversés NIKON Eclipse TS100
– 1 caméra Olympus EP50
– 1 centrifugeuse JOUAN CR4i
– 1 centrifugeuse Thermo Sorvall ST16R
– 1 centrifugeuse Eppendorf 5418
– 1 compteur de cellules Life Technologies Countess II FL
– 1 cytomètre BD Accuri C6, lasers 488 et 630 nm
– 1 lecteur de microplaques Labsystems Multiskan MS + Imprimante Epson LX300
– 1 lecteur de microplaques Labtech LT 5000 MS – AMPRS-900
– 1 agitateur 6 plaques Heidolph Titramax 1000